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常溫超薄切片光電關聯(lián)技術的應用

點擊次數(shù):809 更新時間:2022-05-12

神經(jīng)科學是一個涉及神經(jīng)系統(tǒng)結構和功能研究的多學科領域,目的是了解認知和行為過程的發(fā)展,以及了解和找到疾病治療方法,如阿爾茨海默氏癥或帕金森氏癥。顯微技術的應用對于細胞和亞細胞水平的神經(jīng)系統(tǒng)可視化以及觀察特定背景下的任何分子變化至關重要。近年來,深部組織成像方面的進展讓人們對神經(jīng)元功能有了更進一步的認識,一些新興技術如遺傳細胞標記和光遺傳學也協(xié)同推動了這些發(fā)展。
 
神經(jīng)生物學研究的成像挑戰(zhàn)

神經(jīng)系統(tǒng)的研究往往需要高分辨率、深度成像和大斷面可視化相結合。還需要靈活地對不同類型的樣本進行圖像處理,如活細胞、組織、有機化合物和模型生物體。
快速動態(tài)過程的研究,如細胞運輸或突觸重塑,需要高速顯微鏡。高速顯微鏡的主要挑戰(zhàn)之一是獲取高分辨率圖像,同時避免熒光飽和。
神經(jīng)科學研究通常涉及到大視野和立體成像。減少熒光散射和背景信號的需求使得獲取高對比度和分辨率的圖像變得困難,這在檢查大腦切片等致密組織中的神經(jīng)元結構時尤為關鍵。


神經(jīng)生物學研究的顯微鏡方法

對于神經(jīng)生物學而言,照亮黑暗的大腦,需要一束光,brainbow技術應允誕生,相繼的各種標記方式已使得我們可以看到五顏六色的大腦結構?;诠鈱W的研究方法已成為神經(jīng)科學領域的主要研究手段,其中實現(xiàn)了高分辨三維成像的光學成像技術、可以進行大范圍神經(jīng)記錄的功能性成像技術,以及可運用光來控制神經(jīng)功能的光遺傳學技術,這些技術具有高空間分辨率、組織低損傷性和遺傳特異性等優(yōu)勢,助力神經(jīng)科學領域的研究取得了一系列突破。

對于深部活體成像,往往使用多光子顯微鏡,憑借近紅外激發(fā)的能力減少了光散射,使深部成像具有小的損傷性。光片顯微鏡對于光敏或3D樣品也是比較好的選擇,減少光毒性的同時又可以提供固有的光學切片和3D成像。

光遺傳學是一種利用光控制神經(jīng)活動的技術,能夠研究特定的神經(jīng)網(wǎng)絡和細胞信號,需要在神經(jīng)元細胞膜上表達光敏蛋白。利用光遺傳學結合毫秒級精度計時方法在納米尺度上深入研究潛力巨大,可以研究細胞動態(tài)過程中的特定時間點。

電生理學研究的是組織和細胞的電性,包括研究神經(jīng)元的電性。神經(jīng)和肌肉細胞的功能依賴于流經(jīng)離子通道的離子電流。研究離子通道的一種方法是使用貼片夾緊法,該方法可以對離子通道進行詳細的研究,并記錄不同類型細胞的電活動,典型的就是像神經(jīng)元這樣的可興奮細胞。

神經(jīng)生物學研究Leica方案

THUNDER Imagers

Cy5(洋紅色):β-Ⅲ型微管蛋白;Rhod(紅色):NG2蛋白,GFP(綠色):巢蛋白;DAPI(藍色):細胞核
THUNDER Imagers能夠幫您獲得對細節(jié)的清晰圖像,即使是在完整樣品內部,也能實時觀察清晰圖像。THUNDER Imagers獲取銳利圖像的能力從根本上改變了研究人員從事生物體、組織切片和器官等3D細胞培養(yǎng)物成像時的工作方式,并且可以使用比“標準”寬場顯微鏡更厚的切片和更大的組織。
 
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